1.V-P试验需要在碱性环境下生成二乙酰，α-萘酚可加速此反应。
2.吲哚试验需要沿着试管壁缓慢加入吲哚试剂，使吲哚试剂与培养基分层。
3.甲基红试验培养基pH下降到4.5以下，加入甲基红变红，为阳性结果。
4.细菌分解枸橼酸盐产碱，溴麝香草酚蓝遇碱变蓝为阳性。
5.硝酸盐还原试验有时需要观察细菌能否产生氮气。