抑菌试验的概述

1) 抑菌片的制备：取无菌并干燥的滤纸片。每片滴加抑菌剂溶液 20μl，后将滤纸片平放于清洁的无菌平皿内，开盖置温箱(37℃) 中烤干，或置室温下自然干燥后备用。 溶出性抗（抑）菌产品，可直接制成直径为 5mm，厚不超过 4mm圆片(块)，每 4 片(块) 一组。

2) 阴性样片的制备：取无菌干燥滤纸片，每片滴加无菌蒸馏水 20μl，干燥后备用。溶出性抗（抑）菌产品的阴性对照样本，取同种材质不含抑菌成份的相同大小的样品。

3) 试验菌的接种：用无菌棉拭子蘸取浓度为 5～5×106cfu/ml 试验菌悬液，在营养琼脂培养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动 60°，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温干燥 5min。

4) 抑菌剂样片贴放：每次试验贴放1个染菌平板，每个平板贴放4片试验样片，1 片阴性对照样片，共 5 片。用无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距 25mm以上，与平板的周缘相距 15 mm 以上。贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面。盖好平皿，置37℃温箱，培养16h～18h 观察结果。用游标卡尺测量抑菌环的直径 (包括贴片) 并记录。试验重复3次。

5) 测量抑菌环时，应选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行。 测量其直径应以抑菌环外沿为界。

6)评价规定：抑菌作用的判断：

抑菌环直径大于 7mm 者, 判为有抑菌作用。

抑菌环直径小于或等于 7mm 者, 判为无抑菌作用。

3 次重复试验均有抑菌作用结果者, 判为合格。

阴性对照组应无抑菌环产生。否则试验无效。

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